有關(guān)細(xì)胞離心，我們對(duì)遇到的常見問題做一個(gè)總結(jié)：

1、細(xì)胞離心的轉(zhuǎn)速和時(shí)間。

2、細(xì)胞離心轉(zhuǎn)速太高會(huì)不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞死亡。

3、細(xì)胞離心多少g.

4、細(xì)胞離心目的和原理。

5、哪些實(shí)驗(yàn)需要做細(xì)胞離心。

辛辛苦苦培養(yǎng)的細(xì)胞，如果因?yàn)殡x心轉(zhuǎn)速太高，出現(xiàn)細(xì)胞死亡，這種重新再來的心情小編深有體會(huì)，為了更好的做好實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)細(xì)胞分離的這一課，我們請(qǐng)來專家進(jìn)行一一講解。

細(xì)胞離心機(jī)

細(xì)胞離心轉(zhuǎn)速：

因?yàn)檗D(zhuǎn)速（RPM）不等同于相對(duì)離心力，同樣的轉(zhuǎn)速得到的離心效果并不盡相同，根本的解決方法還是使用相同的相對(duì)離心力（RCF）。

細(xì)胞離心的目的和原理：

1．保證細(xì)胞轉(zhuǎn)移的*性

低速離心可以防止細(xì)胞液積存在管蓋和管壁，保證細(xì)胞轉(zhuǎn)移的*性。

2．便于控制細(xì)胞濃度

對(duì)于細(xì)胞濃度要求高的實(shí)驗(yàn)，比如需要根據(jù)細(xì)胞數(shù)計(jì)算染料濃度的實(shí)驗(yàn)，根據(jù)細(xì)胞數(shù)計(jì)算接種細(xì)胞量的傳代實(shí)驗(yàn)，單細(xì)胞測(cè)序相關(guān)實(shí)驗(yàn)等，在細(xì)胞計(jì)數(shù)、離心收集后再根據(jù)細(xì)胞數(shù)量確定重懸體積，更利于控制細(xì)胞濃度

哪些實(shí)驗(yàn)需要做細(xì)胞離心？

◎ 原代細(xì)胞分離

◎ 細(xì)胞傳代培養(yǎng)

◎ 免疫細(xì)胞分離

◎ 檢測(cè)前細(xì)胞樣品處理

細(xì)胞離心要注意些什么？細(xì)胞離心多少g？

◎ 溫度敏感型細(xì)胞需要溫控精準(zhǔn)，減少細(xì)胞溫度應(yīng)激

◎ 細(xì)胞洗滌離心時(shí)，應(yīng)盡量棄去上清，避免培養(yǎng)液/PBS 殘留，影響后續(xù)染色等操作

◎ 升降速過程可能造成細(xì)胞的機(jī)械損傷，離心時(shí)應(yīng)控制升/降速率

◎ 細(xì)胞制品在收集過程應(yīng)嚴(yán)格控制可能產(chǎn)生的污染

◎ 應(yīng)將離心過程標(biāo)準(zhǔn)化，利于提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性

細(xì)胞離心的轉(zhuǎn)速和時(shí)間？

轉(zhuǎn)子啟動(dòng)運(yùn)行后，升降速過程可能造成細(xì)胞的機(jī)械損傷; 活細(xì)胞的離心速度一定要低，優(yōu)選水平離心，收集更充分。

不同類型細(xì)胞離心，它們適合的條件也不同。

傳代細(xì)胞離心收集：

離心條件：80g-300 x g，常溫或者 37°C，時(shí)間 3-5 min

檢測(cè)用細(xì)胞離心：

離心條件：100g-300 x g，常溫或者 4°C，時(shí)間 3-10 min

特殊細(xì)胞離心收集：

PBMC 分離條件，400 x g，4°C，20 min

推薦做細(xì)胞分離的實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)需滿足以下參數(shù)：

◎ 升降速度可控，有利于細(xì)胞梯度離心，減少機(jī)械損傷，同時(shí)防止細(xì)胞重懸，保證細(xì)胞活率和回收率。

◎ 多種水平轉(zhuǎn)子可選，適配各種離心耗材，充分滿足實(shí)驗(yàn)需求。

◎ 溫度控制精確，離心過程的溫度可實(shí)現(xiàn) 32°/35°/37° 等所需溫度，減少溫度變化對(duì)細(xì)胞的傷害。

◎ “At set RPM" 定速計(jì)時(shí)功能，可在達(dá)到預(yù)設(shè)轉(zhuǎn)速時(shí)才開始計(jì)時(shí)，去除了升至設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)耗費(fèi)的時(shí)間，確保離心時(shí)間為設(shè)定時(shí)間，實(shí)現(xiàn)離心的充分和可重復(fù)。

◎ 可選擇氣密性配件，減少污染風(fēng)險(xiǎn)。

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